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外源凝集素技术&鲎试剂技术

发表时间:2019-08-07 15:44作者:武汉新启迪Xinqidi来源:http://www.qidibio.com

外源凝集素技术&鲎试剂技术


外源凝集素技术

外源凝集素(lectin)又称植物凝集素、凝集素或选择素,是广泛存在于动植物细胞内的一种糖蛋白成分,是机体中除抗体和酶之外的第三类具有识别作用的蛋白质,它可与某一特定细菌发生特异性结合,从而对细菌具有鉴定作用。

外源凝集素通过与细菌细胞表面的糖蛋白或糖脂中的特异性糖基发生两点以上的多部位结合,形成细胞间桥梁,则导致细菌凝集。这种凝集具有两个基本特点,一是非共价键结合,结合力弱而且可逆;二是具有高度的糖专一性,即不同的凝集素只能与各自专一的糖基结合,如炭疽杆菌细胞表面具有含半乳糖的多糖成分,所以具有半乳糖专一性的凝集素,如大豆凝集素(SBA)、植物血凝素(PHA),就能与其发生特异性结合。

应用外源凝集素对细菌鉴定时,首先要筛选出能和某一特定细菌发生特异性结合的凝集素,通常以玻片凝集反应进行试验。即将凝集素液与待鉴定菌液混合后,如出现凝集者为阳性,否则为阴性。也可将凝集素用酶、荧光素或某些载体(如聚氯乙烯珠)结合,制成诊断试剂,这样就可以明显提高反应的敏感性。可应用该试验检定空肠弯曲菌、链球菌、大肠杆菌及军团菌等。


鲎试剂技术

用鲎血变形细胞溶解物制成的鲎试剂,因其中含前凝固酶及凝固原,当前凝固酶遇内毒素后,即被激活,变成凝固酶,它能迅速使试剂中的凝固原凝成肉眼明显可见的胶状蛋白,其凝固速度和程度,与内毒素的含量成正比。依此原理,可用鲎试剂检测革兰氏阴性菌引起的菌血症,及含内毒素的饲料标本,以及蒸馏水中的热原质等。检测的敏感性为0.01~0.001μg/ml内毒素。该试验操作简便,速度快,在2小时内即可报告结果。


文章分类: 试剂盒技术资料
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