CX3CR1表达IL-23的小鼠早期致死性研究 + 细胞 从Villin启动子中表达IL-23的动物( v23 (老鼠)出生时死亡 11 ..死亡原因似乎与小肠出血有关。为了进一步研究IL-23在新生儿中的生物学作用，我们构建了以CX3CR1为靶点表达IL-23的小鼠模型。 + 细胞是在肠道中主要表达IL-23的细胞.这是通过交叉小鼠完成的，其中含有一盒IL-23盒式磁带，在rosa 26位点前有一个浮动停止信号( R23 (老鼠) 12 ，将含有cre-重组酶基因的小鼠插入到 CX3CR1 轨迹( CX3CR1-cre (老鼠) 13 (无花果) 1A )。我们把这些动物称为 CXR 23 老鼠(图1. 1A )。小肠组织中检测到IL-23亚基p19和p40的表达。 CXR 23 ，但不能控制老鼠。 1B，c ). CXR 23 小鼠出生时正常，但50%的幼仔在出生后48小时内死亡，其余幼仔在第8天前死亡(图1)。 1D ). CXR 23 小鼠出生时体重正常，但出生后没有增长(图1)。 1E，f )。新生小鼠的尸检显示SI内有血液存在。大鼠的组织学分析 CXR 23 肠道显示出血来源于破裂的绒毛和与PP Anlagen相似的细胞聚集物(见图)。 1g )。病变位于SI(十二指肠，空肠)，而不在结肠(附图)。 1A )。然后用流式细胞仪检测CX3CR1的数量和定位。 + 小鼠出生时肠道中的细胞。我们发现CX3CR1的数量 + 野生型(WT)小鼠SI中的细胞数高于大肠(图1)。 氢 和补充图。 2A )。的SI中CX3CR1+细胞数 CXR 23 老鼠比对照组的SI高出2倍(图1)。 1I 和补充图。 2A )。细胞聚集在 CXR 23 小鼠体内含有大量的中性粒细胞，这些中性粒细胞破坏了上皮细胞的覆盖(如图所示)。 1g )，以及在IL-22中 + 细胞(图1. 1J )，提示这些细胞在病理学中具有一定的作用。值得注意的是，白细胞介素3的数量，有可能产生白细胞介素-22和白细胞介素-17。 11 ，在 CXR 23 小鼠与对照组比较(图1)。 1K 和补充图。 2B )。常规组织学分析未发现其他器官(肾、心、肺和脑)出现异常(补充图)。 1A )。综上所述，这些发现证实了我们先前观察到的小鼠肠道中IL-23的表达会导致早期致命性。 11
图1 CX3CR1中IL-23的本构表达式 + 细胞导致早期死亡。 a 发电计划 CXR 23 老鼠。 R23 在rosa 26位点上含有IL-23p19和p40的基因敲入的小鼠被杂交到 CX3CR1-cre 小鼠产生 CXR 23 老鼠。 b , c 相对表达 P19 (b )和 P40 (c )在WT和 CXR 23 小鼠出生后第1天(P1)( n =10只小鼠/组)。 d WT和WT的生存曲线 CXR 23 小鼠(WT， n =35， CXR 23 , n =87)。 e 体重(WT)和 CXR 23 老鼠( n =11-24只小鼠/组)。 f 具有代表性的WT和 CXR 23 老鼠在P3。 g 具有代表性的小波及小肠H&E染色切片 CXR 23 老鼠在P1。inset显示在肠道内有红细胞存在。 CXR 23 老鼠。小肠糜烂性病变的典型图像 CXR 23 小白鼠在P1(右侧)。标尺=50μm。 h , i CX3CR1的流式细胞分析 + 野生型大(Li)和小(SI)肠壁中的细胞( h )和 CXR 23 (i )小鼠出生后第1天( n =3~5只小鼠/组。 j 小肠免疫染色 伊尔-22tdTomato (WT)和 CXR 23/IL-22tdTomato (CXR 23 )用抗-tdTomato抗体免疫小鼠P1。注意白细胞介素-22阳性细胞在大鼠肠道内的积聚 CXR 23 有侵蚀性病变的小鼠(右面板)。标尺=50μm。 k 第3组先天性淋巴样细胞总数 + )小肠中的细胞 CXR 23 老鼠在P1。ILC 3 + 细胞在CD 45上有门控 + 林 − Thy1 + SCA-1 嗨 n =8只小鼠/组)。数据显示为平均值±扫描电镜。非参数Mann-Whitney检验的统计分析 b , c , h , i ，和 k ..用对数秩检验进行统计分析 d ..ANOVA与Bonferroni后自组织检验的统计分析 e . **p < 0.01 and ***p < 0.001. Source data are provided as a Source Data file
无菌 CXR 23 老鼠的寿命增加了 我们实验室先前的工作表明，IL-23的表达可以改变肠道的通透性，并促进细菌在新生儿时期的易位。 11 ..为了研究细菌是否与早期致命性的表型有关，我们 CXR 23 无菌小鼠(简称GF) CXR 23 GF 老鼠)。如前所述，大约50%的 CXR 23 SPF小鼠出生后48小时内死亡。超过95% CXR 23 GF小鼠在这一点上还活着，并且活到30天(补充图)。 3A )。肠壁未见出血 CXR 23 GF 老鼠出生时或以后(附图)。 3B )。中性粒细胞存在于SI中，但不破坏上皮细胞(附图)。 3C )。结果表明，新获得的微生物区系参与了观察到的肠出血表型的形成。 CXR 23 SPF级新生儿。
小鼠皮肤表达IL-23的早期致死性研究 为了进一步研究白细胞介素-23(IL-23)表达引起的早期致死性和身体发育迟缓的相关因素，我们设计了另一个菌株，将IL-23的表达定向于角质形成细胞，通过杂交将IL-23导入角质形成细胞。 R23 小鼠 12 小鼠携带由K14启动子驱动的cre-重组酶。 2A )。这些动物，我们称之为 KS 23 小鼠，在皮肤中表达的IL-23水平高于对照组(如图所示)。 2B，c 在皮肤中表达的IL-23水平高于其他器官(舌头、食道和肠)(如图所示)。 2B，c )。这个 KS 23 小鼠出生时体重正常。 二维空间 )。到第5天 KSR 23 老鼠的胃里有牛奶，但比它们的对照小得多(图中所示)。 2D，e )。类似于 CXR 23 老鼠， KSR 23 小鼠过早死亡(15天前)(见图)。 2F )，但在皮肤、肠道或检查的其他器官中没有显示疾病的迹象(附图)。 1B )。在动物身上一个值得注意的发现是腹泻，还有黄色的凳子(图一)。 2G )，这表明食物吸收不良。导致吸收不良的情况与粪便脂肪含量增加有关，通常称为脂肪漏。以确定 KSR 23 小鼠出现脂肪漏，测定粪便和血清中的甘油三酯(TGS)。 2H，i )。在第五天， KSR 23 小鼠粪便TG升高(图一)。 2H )和降低血清TG水平(图一)。 2I )与WT小控件相比。这些结果表明角质形成细胞中IL-23的本构性表达导致脂肪吸收不良、生长迟缓和早期死亡。
图2 IL-23在K14中的本构表达 + 细胞导致早期死亡。 a 发电计划 KSR 23 老鼠。 KSR 23 小鼠通过杂交产生。 R23 小鼠从K14启动子中表达cre-重组酶( K14-cre 老鼠)。 b , c 相对表达 P19 (b )和 P40 (c )mRNA在WT和 KSR 23 P7小鼠( n =4~13只/组。 d 体重(WT)和 KSR 23 老鼠在生命的第一周( n =14-26只小鼠/组)。 e 具有代表性的WT和 KSR 23 小鼠在P5。 f WT和WT的生存曲线 KSR 23 小鼠(WT， n =54； KSR 23 , n =105)。 g Wt和WT大肠的代表性图 KSR 23 老鼠在第5天。注意到结肠内有软黄色的大便。 KSR 23 老鼠。 h 中药大便中甘油三酯的定量研究( n =12)和 KSR 23 (n =21)P5小鼠。 i 西葫芦血清甘油三酯的含量测定(英文) n =35)和 KSR 23 (n =18)P5小鼠。数据显示为平均值±扫描电镜。单因素方差分析 b , c ..ANOVA与Bonferroni后自组织检验的统计分析 d ..用对数秩检验进行统计分析 f ..非参数Mann-Whitney检验的统计分析 h , i . *p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001. Source data are provided as a Source Data file
IL-23表达小鼠血清细胞因子水平的升高 为了开始评估导致生长发育迟缓和早期死亡与IL-23表达相关的机制，我们检测了小鼠血清中IL-23和其他细胞因子的水平。 CXR 23 和 KSR 23 老鼠。血清IL-23水平升高 CXCR 3 和 KSR 23 小鼠(分别是对照组的7倍和2.5倍)(补充图)。 4A 和 4B )。血清IL-22、IL-17、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-1(IL-1β)水平显著升高，而粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子水平无明显升高(P>0.0 5)。 CXR 23 小鼠(附图) 4A )。血清中IL-22、IFN-γ和IL-1β水平显著升高(P<0.0 5)。 KSR 23 小鼠(附图) 4B )。一般来说，血清中的细胞因子水平与白细胞介素-23的水平相关，其变化更明显。 CXR 23 老鼠。血清中最上调的细胞因子 CXR 23 和 KSR 23 小鼠为IL-22，总水平分别为10 ng/ml和4 ng/ml(附图)。 4A，b )。血清中细胞因子水平明显升高，提示这些分子在发病机制中可能起一定作用。
IL-22基因消融降低致命性 为了检验白细胞介素-22在体内是否参与了白细胞介素-23的致病作用，我们进行了交叉杂交。 CXR 23 和 KS 23 小鼠白细胞介素-缺乏( 伊-22 −/− )小鼠在我们的实验室(补充图。 5 和 2C )。IL-22缺乏 CXR 23(CXR 23/IL-22) −/− ) 和 KSR 23 (KSR 23) /IL-22 −/− )小鼠的寿命延长了(如图所示)。 3A，d )和正常生长。 3B，e 表明IL-22在这些动物的发育迟缓和致死性表型中起着重要作用。值得注意的是，没有一个白细胞介素-22缺乏症。 CXR 23 被检查的小鼠有肠出血(图一)。 3C )。为了进一步证明IL-22在发病机制中的作用，我们检查了仍表达IL-23和IL-22的动物，但缺乏IL-22R(IL-10R2)的一条链。这些老鼠被称为 CXR 23/IL-10R2 −/− 老鼠。类似于上面观察到的情况，IL-22信号被灭活的动物存活时间更长(见图)。 3A )，在P3时体重正常(如图所示)。 3B )。这些结果表明IL-22是小鼠出生时表达IL-23的主要细胞因子。
图3 IL-22或IL-10R2的基因消融降低了表达IL-23的新生儿的致死率，恢复了正常的身体生长。 a 生存曲线 CXR 23 , CXR 23/IL-22 −/− ，和 CXR 23/IL-10R2 −/− 老鼠( CXR 23 , n =87， CXR 23/IL-22 −/− n =28， CXR 23/IL-10R2 −/− n =12)。 b 体重， CXR 23，CXR 23/IL-22 −/− ，和 CXR 23/IL-10R2 −/− 在P3( n =3~25只小鼠/组)。 c 小肠代表H&E染色切片 CXR 23/IL-22 +/+ 和 CXR 23/IL-22 −/− 老鼠。INSET显示肠内有糜烂性病变和淋巴聚集区的放大。 CXR 23/IL-22 +/+ 和 CXR 23/IL-22 −/− 分别是老鼠。标尺=50μm。 d 生存曲线 KSR 23 和 KSR 23/IL-22 −/− 老鼠( KSR 23 , n =108； KSR 23/IL-22 −/− n =25)。 e WT的重量曲线， 伊-22 − /− KSR 23 ，和 KSR 23/IL-22 −/− 老鼠随着时间的推移( n =5-33只小鼠/组)。数据显示为平均值±扫描电镜。用对数秩检验进行统计分析 a , d ..单因素方差分析 b ..ANOVA与Bonferroni后自组织检验的统计分析 e . 注： p >0.05和* p < 0.001. Source data are provided as a Source Data file
肠道和胰腺基因表达异常 血清中IL-23及其他细胞因子水平较高。 CXR 23 和 KSR 23 小鼠多于WT小鼠(补充图。 4 )。我们推测这些变化可能会影响新生小鼠的生长。新生儿的身体生长取决于他们摄取、加工和吸收营养的能力。 CXR 23 和 KSR 23 老鼠的胃里有牛奶，表明食物摄入没有受到影响。为了研究细胞因子的升高是否会影响身体的生长，我们检查了胰腺和肠道的转录组，这些器官对营养物质的加工和吸收至关重要。为此，我们从表达IL-23的5日龄小鼠胰腺和空肠中提取RNA。 KSR 23 并进行RNA测序(RNAseq)。
如图所示。 4A，b ，胰腺的转录体 KSR 23 P5小鼠与对照组小鼠差异显著。KEGG通路分析显示，与胰腺分泌有关的几个基因在胰腺中被下调。 KSR 23 老鼠(图1. 4C )。胰腺分泌途径包括编码几种参与食物消化的胰腺酶的基因和参与分泌途径的基因(如图所示)。 4C )。在下调的基因中 KSR 23 老鼠是那些编码胰酶的人，包括胰淀粉酶(淀粉酶2a， Amy2a ；淀粉酶2b， AMY2B )、脂肪酶( 普利普 )，弹性蛋白酶(弹性酶1， 凯拉1 ; 弹性蛋白酶2a , (Cela2a) ，以及蛋白酶(羧肽酶1， CPA 1 ；羧肽酶2， CPA 2 与激肽释放酶1相关的肽酶b5， Klk1b5 类糜蛋白酶 克特 ；糜蛋白酶C， CTRC )(图1. 4D )。其他参与胰腺腺泡分泌的基因也被下调，包括合成胶原蛋白。 赛肯 )，一种调节酶原颗粒融合的蛋白质 14 ..水通道蛋白12( AQP 12 )，一种腺泡特有的水通道，控制胰液的分泌。 15 ，在胰腺中也被下调。 KSR 23 老鼠(图1. 4E )。其中一些变化被定量PCR(QPCR)证实。 4F ).
图4 胰腺分泌途径减少 KSR 23 老鼠。 a WT和WT生物复制体RNAseq表达数据的主成分分析 KSR 23 胰腺( n =5/组)。 b 在所有检测到的转录本中，LOG 2 FC(Log 2 Fc)和log 2 CPM(log 2每百万计数)的图。根据表达状态对点进行着色：非显着性基因(灰色)和显着性基因(385个基因)； Q < 0.05; log 2 FC > 1 or log 2 FC < −1; red). c 大鼠胰腺中明显下调基因的KEGG通路分析 KSR 23 老鼠( Q < 0.05; terms >3 genes; % Genes/term >4; κ 0.4). d Z -与GO术语“胰腺分泌”和腺泡分泌酶相关的下调基因的热图。 e 与酶原包装有关的下调基因的热图。 f 编码消化酶基因的qPCR验证。数据以均值±扫描电镜显示，用非参数Mann-Whitney检验进行统计分析.* p < 0.05 and **p < 0.01. Source data are provided as a Source Data file
转录调控基因 Ptf1a 控制腺泡细胞分泌蛋白的加工和包装 16 ..灭活 Ptf1a 在成年腺泡细胞中，腺泡细胞的同一性降低，这与导管细胞标记物Sox 9和角质形成19(KRT 19)的出现相一致。 16 ,17 ..我们观察到 Ptf1a (无花果) 5A )和增加表达 SOX 9 (无花果) 5B )在胰腺中 KSR 23 老鼠。这些结果提示腺泡细胞在. KSR 23 小鼠可获得导管细胞表型。为了确定是否确实如此，我们分析了KRT 19在WT和Wt胰腺中的表达。 KSR 23 小鼠免疫染色(图1)。 5C )。增加的KRT 19 + 胰腺细胞 KSR 23 小鼠与WT小鼠比较(图1)。 5C )。KRT 19主要定位于WT胰腺的大小叶间导管。 5C 、箭)。然而，在 KSR 23 小鼠，KRT 19也标记了一群腺泡细胞(图)。 5C 、箭)。这些结果进一步表明胰腺腺泡细胞的功能和同一性受到干扰。 KSR 23 老鼠。
图5 胰腺导管细胞增多 KSR 23 老鼠。 a , b 基因表达的RNAseq分析 Ptf1a (a )和 SOX 9 (b )在WT和 KSR 23 P5小鼠( n =5只小鼠/组)。数据为均值±扫描电镜，用非参数Mann-Whitney检验进行统计分析.* p < 0.05 and **p < 0.01. c WT和WT胰腺的免疫染色 KSR 23 具有抗合成酶和KRT 19抗体的小鼠。箭头显示KRT 19阳性细胞在wt和wt胰腺中的定位。 KSR 23 老鼠。标尺=50μm.源数据作为源数据文件提供
胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、弹性蛋白酶和蛋白酶是由腺泡细胞产生的，通过胰管分泌到SI中。在这个地方，这些前体中的一些被SI产生的酶转化为活性形式，导致食物进一步分解。多肽、氨基酸、脂肪酸、甘油和葡萄糖通过肠细胞刷状边界膜中的转运体到达血液。为了询问白细胞介素-23(IL-23)和其他细胞因子循环水平的升高是否与肠道基因表达的显著变化有关，我们分析了从空肠提取的RNA。 KSR 23 和对照小鼠进行RNAseq。基因表达的总体格局在两组间差异显著。 KSR 23 和对照鼠(图1)。 6A )。有几个基因差异表达，包括白细胞介素-22，以及下游的基因，如 Reg3 基因和消化酶也由空肠产生。 6B )。小波和小波变换的KEGG通路分析 KSR 23 空肠显示参与蛋白质消化和吸收的基因，如糜蛋白酶原B1( Ctrb 1 )、胰蛋白酶原( Prss 1 )、胰蛋白酶( 第5型 和 Tyr 4 )、羧肽酶A1( CPA 1 )，以及类糜蛋白酶类弹性蛋白酶家族成员3b( Cela3b )，在肠道中被下调。 KSR 23 老鼠(图1. 6C )。转录组分析还显示，参与调节极低密度脂蛋白颗粒通路的几个基因的表达降低(如图所示)。 6d，e )。这些微粒调节脂肪和胆固醇向血液中的释放。这些结果表明，IL-23和其他细胞因子的全身性表达与调控胰腺和肠道食物加工的基因转录显著相关。
图6 空肠食物吸收途径的改变 KSR 23 老鼠。 a WT和WT生物复制体RNAseq表达数据的主成分分析 KSR 23 空肠 n =5/组)。 b 在所有检测到的转录本中，LOG 2 FC(Log 2 Fc)和log 2 CPM(log 2每百万计数)的图。根据表达状况对点进行着色：非显着性基因(灰色)和显着性基因(698个)； Q < 0.05; log 2 FC > 2 or log 2 FC < −2; red). c Z 所有与“蛋白质消化和吸收”相关的下调基因的热图得分。 d 对明显下调基因的集群Go分析显示GO足月组“极低密度脂蛋白颗粒”的富集。 e Z -与GO组“极低密度脂蛋白颗粒”相关的所有下调基因的热图
IL-22消融纠正胰酶基因异常表达 为了询问IL-22是否影响胰腺酶的表达，我们检测了几个基因在胰腺中的表达。 KSR 23 和 KSR 23/IL-22 −/− 老鼠。qPCR证实 KSR 23 小鼠信使RNA(MRNA)水平 Reg3β (无花果) 7A )，胰脏脂肪酶，淀粉酶，和 赛肯 胰腺比WT对照组(图1)。 7C，g )。免疫组织化学也记录了蛋白质水平的变化。 7b，h )。删除IL-22 KSR 23 小鼠对这些标记的表达水平以及pSTAT 3的表达水平都有显著的影响，pSTAT 3是一种已知的IL-22信号传导介质。 18 (无花果) 7I )。水平 Reg3β ，淀粉酶，胰脂肪酶，以及 赛肯 在胰腺 KSR 23/IL-22 −/− 表明IL-22或其下游基因在调控胰腺基因表达中起主要作用。
图7 切除IL-22可恢复胰腺基因的表达。 KSR 23 老鼠。 a , c , e , g Wt胰腺中所选基因表达的qPCR分析 伊-22 −/− KSR 23 , 和KSR 23/IL-22 −/− 小鼠在P5。 b , d , f , h Wt胰腺免疫染色， KSR 23 ，和 KSR 23/IL-22 −/− 抗P5抗体小鼠 Reg3β (b )、脂肪酶( d )、淀粉酶( f )，以及合成酶( h )。嵌体显示出更高的放大率。 i pSTAT 3在WT胰腺中的免疫染色 KSR 23 ，和 KSR 23/IL-22 −/− 老鼠。增加的pSTAT 3数目 + 胰腺细胞 KSR 23 老鼠。数据以均值±扫描电镜表示，用单因素方差分析进行统计分析.** p < 0.01 and ***p < 0.001. Scale bars = 50 μm. Source data are provided as a Source Data file
IL-22直接调控胰腺基因的表达 在表达IL-23的动物中，IL-22的缺失恢复了早期死亡和身体发育迟缓的两种主要表型。此外，IL-22的缺失使胰腺中观察到的基因表达的异常恢复.IL-22R在WT小鼠胰腺腺泡细胞中表达，表明IL-22能直接促进小鼠胰腺中IL-22的表达。 Reg3β 由这些细胞 19 ..为了研究IL-22是否直接影响参与营养加工的胰腺基因的表达，我们进行了体外实验。短期(24小时)白细胞介素-22(IL-22)对WT胰腺细胞的增殖有显著的促进作用。 第3b条 如报告所述 19 ，但在表达上没有变化。 Ptf1a , 赛肯 , Amy2a ，和 AMY2B (补充图。 6 )。用白细胞介素-22(60h)培养腺泡细胞后，其表达水平显著下降。 Ptf1a (无花果) 8 )。与.的表达减少相一致 Ptf1a ，我们观察到 赛肯 , Amy2a ，和 Prss 2 在白细胞介素-22刺激的培养物中(如图所示)。 8 )，提示IL-22在这些胰腺基因的调控中起着直接作用。为了证实这些变化是由IL-22信号转导引起的，我们研究了IL-22在IL-10R2缺乏小鼠胰腺细胞中的作用。IL-10R2信号缺乏的胰腺腺泡细胞加入IL-22后，其基因表达无明显变化。 8 和补充图。 6 )，证实所观察到的胰腺基因表达变化是由IL-22受体介导的。这些结果表明，对胰腺基因表达的抑制 KSR 23 小鼠由IL-22介导。
图8 在体外培养的腺泡细胞中，IL-22诱导胰腺酶相关基因表达下调。来自WT的腺泡细胞( 伊-10R2 +/+ )和 伊-10R2 −/− 在IL-22重组蛋白存在下培养小鼠.培养60小时后，检测细胞中胰腺转录因子1a( Ptf1a )，合成蛋白( 赛肯 )，淀粉酶2a( Amy2a )和丝氨酸蛋白酶2( Prss 2 )用qPCR。注意用IL-22培养的WT腺泡细胞下调了几个胰腺相关基因。IL-22不降低IL-10R2缺陷细胞胰腺相关基因的表达.数据以均值±扫描电镜表示，用单因素方差分析进行统计分析.* p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001. Source data are provided as a Source Data file
NEC小鼠胰腺酶表达降低 新生儿死亡的表型 v23 11 和 CXR 23 小鼠使人联想到坏死性小肠结肠炎(Nec)，这是一种以新生儿时期肠坏死和多系统器官衰竭为特征的疾病。 20 ..NEC主要影响早产儿，细菌侵入肠壁，导致IL-23分泌失调。为了验证这一假设，我们在C57BL/6小鼠出生后第7天诱导了NEC，这是Hackam和他的同事描述的程序。 21 ,22 ..qPCR分析表明，与对照组相比，NEC组动物回肠末端IL-23和IL-22表达上调(见图11)。 9a，b )。当系统中的IL-22水平被上调时， CXR 23 和 KS 23 接下来，我们测试了NEC小鼠肠道中IL-23水平的升高是否与循环中IL-22水平的升高有关。如图所示。 9C 我们注意到与对照组相比，NEC小鼠循环中IL-22水平显著升高。我们还检测了胰脏酶的表达， 赛肯 和 Reg3β ，在NEC小鼠胰腺中发生改变。用免疫染色法检测到 Reg3β 降低淀粉酶A，脂肪酶的表达， 赛肯 在动物的胰腺中有NEC(图1)。 9d，e )。结果表明，新生儿炎症NEC模型的肠组织中IL-23和IL-22的表达增加，这些变化与胰腺酶表达失调有关，与我们的转基因模型相似。
图9 坏死性小肠结肠炎(NEC)小鼠胰腺酶产生减少。 a –c IL-23p19的表达 a )和IL-22( b )mRNA在对照组和动物回肠末端的NEC( n =8只小鼠/组)。 c 用NEC测定对照组和动物血清IL-22的含量(英文) n =6-12只小鼠/组。 d 正常小鼠和NEC小鼠胰腺的典型免疫染色。嵌体显示更高的放大率( n =7-8只小鼠/组)。标尺=50μm。 e 中所示图像中荧光强度的量化 d (n =7-8只小鼠/组)。数据以均值±扫描电镜显示，用非参数Mann-Whitney检验进行统计分析.** p < 0.01 and ***p < 0.001. Source data are provided as a Source Data file
