人外周血白细胞DNA的制备
【基本原理】
从全血中制备白细胞DNA，可用水直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜及核膜，释出血红蛋白、细胞核；再用KI裂解细胞核并溶解DNA；最后用酚/氯仿除去蛋白质，加无水乙醇使DNA沉淀，经A260/A280检测DNA含量，再经琼脂糖电泳鉴定。
【器材】
离心机、紫外分光光度计。
【试剂】
1．5mmol/L KI：8.3g KI加H2O到10ml
2．0.9% NaCl
3. 氯仿/异戊醇（24：1）
【操作步骤】
1．取200μl抗凝血，加入1ml 水。
2．8000rpm离心5min，弃上清。
3．沉淀中加入40μl 5mol /L KI，旋涡振荡30Sec。
4．加入200μl 0.9% NaCl，然后再加入300μl氯仿/异戊醇，振荡30Sec。
5．10 000rpm离心5min。
6．小心吸取上清液，加入冷无水乙醇1ml。
7．10 000rpm离心5min，弃无水乙醇。
8．DNA 样品自然干燥。
9．加适量的H2O或TE溶解DNA，
10．核酸定量测定和电泳鉴定。
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