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抗体标记技术-生物素标记

发表时间:2019-07-17 09:06作者:武汉新启迪Xinqidi来源:http://www.qidibio.com

抗体生物素标记

生物素标记反应常用生物素琥珀酰亚胺酯进行。生物素是与抗体分子的游离赖氨酸等发生偶联反应而完成标记。其主要步骤是:

a. 用二甲基亚砜配制10mg/ml的N-羟琥珀酰亚胺生物素(应根据需要选用不同大小和间臂长的生物素化琥珀酰酯)。

b. 用硼酸钠缓冲液(0.1mol/L,PH8.0)稀释单抗溶液至1-3mg/ml。

c. 每毫克抗体加入25-250ug的生物素酯,混匀后,室温作用4小时。

e. 按每250ug生物素酯加入20ul 1mol/L NH4Cl终止反应,室温放置10分钟。

f. 以PBS充分透析除去游离生物素,标记抗体冻存。


文章分类: 抗体技术资料
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